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蜂胶的化学多样性及标准化存在的问题

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    蜂胶是西方蜜蜂从植物的树芽、树皮等部位采集的树脂粘液等再混合蜜蜂的舌腺、蜡腺等腺体分泌物,经蜜蜂加工而成的一种胶状物质。从远古时代,民间就把蜂胶作为一种药物来使用,直到今天在巴尔干半岛上的人们仍然用蜂胶治疗伤口、烧伤、烫伤、咽喉肿痛、胃溃疡等疾病。由于蜂胶在民间使用非常普遍,近30年来研究者对蜂胶的药理活性及化学成分进行了全面的研究。发现蜂胶具有广泛的药理活性:抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗炎症、保肝、抗氧化、抗肿瘤等,而且蜂胶化学成分主要由蜜蜂采集的植物决定,因而在不同地区、不同气候条件下所采集的蜂胶化学成分相差很大。虽然蜂胶的生物学活性特别是抗病源微生物的活性普遍存在,但是决定其生物学活性的化学成分却相差很大,甚至完全不同,所以“蜂胶”不是以化学成分为特征。由于蜂胶化学成分的多样性,给蜂胶的标准化带来很大的问题,目前蜂胶还没有统一的化学标准。为了使蜂胶能够被接受和认可,更好地利用蜂胶;蜂胶必须要进行化学标准化,以确保蜂胶的质量,安全性和有效性。   1.蜂胶能否进行标准化蜂胶来源于植物,植物的多样性决定了蜂胶化学成分的多样性。按照药用植物标准化的方法来确立蜂胶的标准化是合情合理的。药用植物的化学标准化是根据其活性成分建立的,如果这些活性成分巳经被认可和接受,那么必须通过合适的分析方法对活性成分进行量化;如果这些活性成分还不清楚或尚在研究之中,那么就把总提取物作为活性成分,在这种情况下,必须用标记化合物来进行质量控制。对于蜂胶的活性成分以及其中的一些最重要的活性成分如咖啡酸苯乙酯(CAPE)的研究已经积累了一定的知识,但是在大多数热带地区蜂胶中不含有CAPE或者含量很少,CAPE就不可能被用作标记化合物来进行标准化,对于蜂胶的其他活性成分而言,问题也是一样的。在这种情况下,对蜂胶进行完全标淮化是不现实的。根据蜂胶的植物来源和化学成分对蜂胶的某些方面进行标准化还是可行的。

2.蜂胶的植物来源决定蜂胶的化学类型
    蜂胶的植物来源决定蜂胶的化学成分。综合考虑蜂胶的植物来源、化学成分和生物学活性规律,可以为具有明确化学成分和生物学活性的蜂胶类型进行标准化。此外还有其他的蜂胶化学类型。例如,在地中海地区发现的一种蜂胶主要成分是二游烯酸;在巴西,除了绿蜂胶外还有11种其他类型的蜂胶。在蜂胶标准化进程中,对于每一种蜂胶的化学成分、生物学活性以及植物来源都要有详细的、可靠的数据进行比较,这样才能确定在某些特定地区,应用哪一种蜂胶类型作为该地区蜂胶标准化规范的最佳选择。

3."杨属型"蜂胶标准化的建立

    就药理活性和化学成分而言,“杨属型”蜂胶是所有蜂胶类型中研究最全面的一种。通过对杨属渗出物的化学成分的分析,Bankova等选择了7种酚酸类作为标记化合物,通过薄层层析(TLC)方法,建立了简单快速的分析程序,能够把杨属型蜂胶与其他类型的蜂胶相区分开来。

    如果一种特定的蜂胶样本被鉴定出属于“杨属型”蜂胶,那么就可以确定其生物学活性成分,然而在“杨属型”蜂胶中有超过25种酚酸类物质具有不同的生物学活性,所以测定每一种活性成分的含量是非常困难的,Borwehi等研究“杨属型”蜂胶的抗菌活性(对金黄色葡萄球菌的MIC)和各种活性成分所占的比例的相关性时发现,没有一种单一成分活性会超过Pear-son~Lee值,因此推测,发挥生物学活性的物质是一类拥有相同或相近化学结构的多种物质。“杨属型”蜂胶的化学成分可以通过三个参数来表示:总黄酮和黄酮醇、总黄烷酮和黄烷酮醇、总酚酸类,并且通过分光光度法可以快速定量测出“杨属型”蜂胶中这三类主要活性物质:通过氯化铝复合物的形成可以定量测定总黄酮/黄酮醇;通过2,4-二硝基酚(DNP)比色法定量测定总黄烷酮和黄烷酮醇:通过福林一乔卡梯奥(Folin—Ciocalteu)反应测定总酚酸类。该方法测定结果的精确性为84-109%,标准差0.5-6.2%。

    Bankova等根据上面的方法分析了来自欧洲和中东地区114种“杨属型”蜂胶活性成分,并且测定对金黄色葡萄球菌的MIC。结果表明:“杨属型”蜂胶中黄酮/黄酮醇含量为8土4%,黄烷酮/黄烷酮醇6±2%,总酚酸类28土9%,对金黄色葡萄球菌的MIC211±132,^/mlo研究还发现,总酚酸类含量与对金黄色葡萄球菌的MIC之间存在明显的负相关,也就是说总酚酸类含量越高,MIC越低(P=0.003)。

4.结论

    在蜂胶标准化进程中,根据蜂胶的植物来源确定蜂胶类型已经取得了一定的进展,但是还有许多工作需要做。特别是必须确保对蜂胶生物学活性研究结果的可靠性,只有准确可靠的研究结果才有助于推进蜂胶的化学标准化,有助于人们更好地利用和使用蜂胶,最终建立各种类型蜂胶的标准化。

参考文献   1.聊城大学生命科学学院,山东聊城252059;2.杭州师范学院设备与实验室管理处,浙江杭州310012

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